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刺五加浸膏藥典液相色譜儀檢測(cè)方法-HPLC

更新時(shí)間:2013-10-18點(diǎn)擊次數(shù):3983

本品為五加科植物刺五加Acanthopanax senticosus (Rupr. et Maxim.) Harms的干燥根及根莖或莖用水或乙醇提取加工制成的浸膏。

【制法】取刺五加1000g,粉碎成粗粉,加水煎煮兩次,每次3小時(shí),合并煎液,濾過(guò),濾液濃縮成浸膏50g(水浸膏),即得;或取刺五加1000g,粉碎成粗粉,加75%乙醇,回流提取12小時(shí),濾過(guò),濾液回收乙醇至無(wú)醇味,濃縮成浸膏40g(醇浸膏),即得。

【性狀】本品為黑褐色的稠膏狀物;氣香,味微苦、澀。

【鑒別】取本品0.5g,加70%乙醇20ml,超聲處理30分鐘,濾過(guò),濾液蒸干,殘?jiān)蛹状?m1使溶解,作為供試品溶液。另取刺五加對(duì)照藥材2.5g,加甲醇20ml,加熱回流1小時(shí),濾過(guò),濾液蒸干,殘?jiān)蛹状?rnl使溶解,作為對(duì)照藥材溶液。再取異嗪皮啶對(duì)照品、紫丁香苷對(duì)照品,分別加甲醇制成每1ml含異嗪皮啶0.5mg、紫丁香苷l(shuí)mg的溶液,作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(附錄VI B)試驗(yàn),吸取上述供試品溶液與對(duì)照藥材溶液各10μl、兩種對(duì)照品溶液各2μl,分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上,以三氯甲烷-甲醇-水(6:2:1)的下層溶液為展開(kāi)劑,展開(kāi),取出,晾干,置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中,在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的熒光主斑點(diǎn);在與異嗪皮啶對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的熒光斑點(diǎn);噴以10%硫酸乙醇溶液,在105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰,在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的主斑點(diǎn);在與紫丁香苷對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上,顯相同的藍(lán)紫色斑點(diǎn)。

【檢查】 水分 水浸膏不得過(guò)30.0%;醇浸膏不得過(guò)20.0%(附錄Ⅸ H*法)。

總灰分 不得過(guò)6.0%(附錄Ⅸ K)。

其他 應(yīng)符合流浸膏與浸膏項(xiàng)下有關(guān)的各項(xiàng)規(guī)定(附錄I O)。

【浸出物】取本品水浸膏2.5g,精密稱定,置100ml具塞錐形瓶中,精密加水25ml使溶散(必要時(shí)以玻璃棒攪拌使溶散),再精密加水25ml沖洗瓶壁及玻璃棒,密塞,稱定重量,超聲處理30分鐘,放冷,再稱定重量,用水補(bǔ)足減失的重量,搖勻,濾過(guò),精密量取續(xù)濾液25ml,置已干燥至恒重的蒸發(fā)皿中,在水浴上蒸干后,于105℃干燥3小時(shí),置干燥器中冷卻30分鐘,迅速精密稱定重量。以干燥品計(jì)算供試品中水溶性浸出物的含量,不得少于90.0%。或取本品醇浸膏,照醇溶性浸出物測(cè)定法項(xiàng)下的熱浸法(附錄X A)測(cè)定,用甲醇作溶劑,不得少于60.0%。

【含量測(cè)定】 照液相色譜法(附錄VI D)測(cè)定。

色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;以乙腈為流動(dòng)相A,以0.1%磷酸溶液為流動(dòng)相B,按下表中的規(guī)定進(jìn)行梯度洗脫;檢測(cè)波長(zhǎng)為220nm;柱溫30℃。理論板數(shù)按紫丁香苷峰計(jì)算應(yīng)不低于10 000;異嗪皮啶峰與相鄰雜質(zhì)峰的分離度應(yīng)不小于1.5。

時(shí)間(分鐘)

流動(dòng)相A(%)

流動(dòng)相B(%)

0~20

20~30

30~40

40~50

10→20

20→25

40

10

90→80

80→75

60

90

對(duì)照品溶液的制備 取紫丁香苷對(duì)照品、刺五加苷E對(duì)照品、異嗪皮啶對(duì)照品適量,精密稱定,加甲醇(刺五加苷E對(duì)照品先加50%甲醇溶解)制成每1ml含紫丁香苷、刺五加苷E各40μg、異嗪皮啶10μg的混合溶液,即得。

供試品溶液的制備 取本品約0.2g,精密稱定,置小燒杯中,用50%甲醇20ml,分次溶解,轉(zhuǎn)移至25ml量瓶中,超聲處理(功率250W,頻率50kHz)10分鐘,取出,放冷,加50%甲醇至刻度,搖勻,濾過(guò),取續(xù)濾液,即得。

測(cè)定法 分別精密吸取對(duì)照品溶液10μl與供試品溶液10~20μl,注入液相色譜儀,測(cè)定,即得。

本品按干燥品計(jì)算,水浸膏含紫丁香苷(C17H24O9)不得少于0.60%、刺五加苷E(C34H46O18)不得少于0.30%、異嗪皮啶(C11H10O5)不得少于0.10%;醇浸膏含紫丁香苷(C17H24O9)不得少于0.50%、刺五加苷E(C34H46O18)不得少于0.30%、異嗪皮啶(C11H10O5)不得少于0.12%。

【貯藏】密封。

【制劑】刺五加片

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