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        濟南免疫親和柱的測定原理和操作流程
        
              
        
                  更新時間：2021-03-21點擊次數(shù)：1486
              
        
              
        
                   　　濟南免疫親和柱測定的基礎(chǔ)是抗原抗體反應(yīng)，B1單克隆抗體連接在柱內(nèi)凝膠介質(zhì)上，樣品中的經(jīng)過提取、過濾、稀釋，然后將樣品提取液緩慢通過免疫親和柱，在免疫親和柱內(nèi)，與抗體結(jié)合，洗滌液通過免疫親和柱除去未被結(jié)合的雜質(zhì)。采用甲醇洗脫，然后進行相關(guān)分析。
         
        　　濟南免疫親和柱的操作流程：
        　　①樣品處理：參照各法，對樣品進行處理。
         
        　　②凈化：
        　　（1）柱子預(yù)處理：取出免疫親和柱，恢復至室溫，將上端塞子取出，打開下端堵頭，將柱內(nèi)保存液流掉至高于凝膠上界面3-5mm處，停止流液（或?qū)⒚庖邔游鲋苯舆B接于20ml注射器下）。
         
        　　（2）加樣：加入處理好的樣品液10ml，打開下端堵頭，調(diào)節(jié)流速至1-2滴/秒，直至空氣進入親和柱中，棄去流出液。
         
        　　（3）淋洗：液體*排凈后，依次用PBS緩沖液10ml、蒸餾水10ml，淋洗，流速為1-2滴/秒，棄掉流出液，抽干。
         
        　　（4）洗脫：加入色譜級溶液，調(diào)節(jié)流速為1滴/秒，緩慢洗脫，收集全部洗脫液，用色譜級溶液定容至1ml（即為凈化后的樣品）。
         
        　　③檢測
        　　凈化后樣品可直接用HPLC（高效液相色譜法）、GC-MS（氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀）、ELISA（酶聯(lián)免疫吸附法）等方法進行檢測。
        
              
        
          
        
      
        
      
  
        
  
        
      
  
        

        









 
  




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